Le NMB Nouveau Musée Bienne réunit plus de 35'000 objets qui témoignent de l'histoire régionale, de la culture et de l'art, de la préhistoire à nos jours. Les collections comprennent l'archéologie avec les trouvailles lacustres de renommée internationale, l'histoire culturelle et industrielle biennoise, les collections d'art régional incluant les œuvres de la famille Robert et de Karl Walser, ainsi que la Cinécollection W. Piasio et la collection consacrée au clown Grock.
Seule une fraction des objets peut être présentée dans les expositions permanentes et temporaires, le reste étant conservé dans les réserves et faisant l'objet de recherches scientifiques.